苗圃从小出生在表演世家,父母是秦腔演员。父亲苗德发在陕西戏曲研究院工作,母亲黄孝贤在陕西省戏曲研究院秦腔团工作。1984年,五岁的苗圃第一次演出,剧团里排《祝福》,演的是祥林嫂的儿子阿毛。1995年,苗圃获得了全国第二届影视表演推新人大赛第一名。被媒体评为“四小青衣”的苗圃,1996年她拍摄了张子恩导演的电影《白马飞飞》,进入影视圈,除在国内首部进入数字院线的电视电影《关中刀客》中有上佳表现外,她还拍摄了吴子牛导演的大戏《热血忠魂之独行侍卫》。1998年,苗圃顺利进入北京电影学院就读本科。
2000年,苗圃参演电视剧《百姓》。
2001年,苗圃被导演张建栋相中,在电视剧《绝对控制》中饰演楚晓明。演完之后便签约“冯小刚工作室”。
2003年,苗圃被冯导推荐到电视剧《五月槐花香》剧组。同年参演《绝对控制》,其中她塑造了“中国第一警花”,从此奠定了“四小青衣”的地位。同年,苗圃获得国际人口联盟(PCI)的邀请,赴美参加美国电视节,并出席艾美奖颁奖典礼,成为内地女演员获此殊荣第一人。
2004年,和吴宗宪合拍古装喜剧《猜心妙手》,并于2006年4月25日播出。
2004年,和张国立、王刚、张铁林合作电视剧《五月槐花香》,同年苗圃就曾凭借该角色入围了飞天奖最佳女演员奖,2007年凭借该剧又入围金鹰奖。
2005年,拍摄的电影《雪花那个飘》也在戛纳电影节上露面。6月,苗圃参演了《求求你,表扬我》。
2006年,与孙红雷主演的央视大戏《范府大院》,以孙红雷和苗圃两个范府的仆人为主线,展现一个大家族在历史民族动荡中的盛衰史。
2007年11月30日,和日本演技男星中井贵一合作了电影《凤凰》,又在影片《樱桃》中挑战演技,扮演一个智障母亲。同时她主演的电视剧《女人的选择》播出。
2008年9月2日,参演的电视剧《我们俩的婚姻》播出;11月20日,在电影《证人》中扮演张家辉的植物人妻子阿丽。
2009年2月4日,参演的的电影《高兴》上映,在片中饰演杏胡;同年,苗圃则主演两部荧屏作品《闯关东2》和《走西口》。6月,参与录制减法生活主题曲《最美的星球》,与韩红、陈晓东、杨坤、陈楚生、李霞等14位明星联袂演唱。同年为祖国60华诞录制歌曲《我的中国我爱你》由苗圃、侯耀华、黄渤、庞龙、姜超、金巧巧、关凌、汪正正、吕薇、王铮亮、张大礼、谢楠、李琛等艺人联袂献唱。
2010年,苗圃与张家辉通过电影《线人》再续前缘,并在电影《一不留神》中首次出演反面角色,饰演一个为了谋取他人钱财而装神弄鬼的女骗子。2009年6月参与录制减法生活主题曲《最美的星球》,与韩红、陈晓东、杨坤、陈楚生、李霞等14位明星联袂演唱。同年为祖国60华诞录制歌曲《我的中国我爱你》由苗圃侯耀华、黄渤、庞龙、姜超、金巧巧、关凌、汪正正、吕薇、王铮亮、张大礼、谢楠、李琛等艺人联袂献唱。
2011底,参与录制电影频道《首映》慈善晚会主题曲《因为爱相信爱》。
2012年1月2日,苗圃主演的古装传奇大戏《穆桂英挂帅》播出;2月14日,电影《真心话大冒险》上映,苗圃饰演的是一位女跆拳道教练;同年,参与录制奥运歌曲《北京祝福你》。
2014年12月23日,与罗晋共同主演的电视剧《枪侠》播出,饰演刘子妍。
2015年,参演电视剧《香火》《修仙记之何仙姑传》。12月23日,作为嘉宾出席了第30届中国电视剧飞天奖典礼。
2017年4月,参加综艺节目《跨界歌王第二季》。
2018年1月19日,参演电视剧《孤战之生死营救》。8月16日,发行专辑《由我不由天》。8月16日,主演的电视剧《桃花依旧笑春风》播出。
2019年1月1日,凭借《桃花依旧笑春风》获得2018国剧盛典演技卓越女演员奖。11月12日,主演的电视剧《鹤唳华亭》在优酷首播,在剧中饰演赵贵妃。
2020年1月1日,主演的反特悬疑剧《破局1950》在中央电视台电视剧频道播出,在剧中饰演刘玉娥。8月18日,主演的电影《画饼》开机,在剧中饰演姚梅。9月22日,参演的电视剧《别云间》定档在优酷播出。11月19日至22日,主演的话剧《情系贺兰》在北京二七剧场首演,在剧中饰演郭闽兰。
2021年4月15日,主演的电视剧《骊歌行》定档在腾讯视频、爱奇艺播出,在剧中饰演长孙皇后。11月22日,参演的电视剧《陪你逐风飞翔》定档在腾讯视频播出,在剧中饰演庄阅。
2022年5月19日,主演的电视剧《传家》定档在优酷播出,在剧中饰演黄莹如。
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